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[鲁米诺化学发光检测应用] 鲁米诺化学发光在离子或生物学检测中的应用鲁米诺（luminol）是最常用的化学发光试剂之一。在碱性溶液(pH=10～11)中加入适当的氧化剂或者催化剂，如H202、K2S208、NaClO、Fe(II)盐、Mn(II)盐、Cu(II)氨配合物离子、K3Fe(CN)6、过渡金属离子、辣根过氧化物酶、微过氧化物酶等，可以极大地提高化学发光强度...
[荧光探针法检测钙离子浓度] 应用荧光探针法（Fluo-3、Fluo-4）检测钙离子浓度钙离子（Ga 2+ ）是细胞内重要的信息传递物质。细胞内钙不仅作为一种重要的第二信使广泛参与细胞的运动、分泌、代谢和分化等多种细胞功能活动的调节，而且胞内钙离子浓度的变化与调控对于参与维持存在于细胞质膜或细胞器膜两侧的跨膜梯差，以及介导细胞对外界刺激的应答反应具有重要的调节作用。对于静息和受刺激时胞...
[干扰素的生物学活性检测] 应用荧光素酶报告基因进行I型干扰素的生物学活性检测干扰素（Interferon，IFN）是重要的抗病毒活性物质，是机体非特异免疫系统的重要组成部分，在动物和人类抗感染和肿瘤临床治疗上有着广泛的应用。但长期以来一直缺乏理想的INF活性标准定量检测方法。以往常用的...
[荧光素酶影响因素及注意事项] 荧光素酶报告基因检测影响因素及注意事项 1．报告基因检测受多种因素影响（载体状态、细胞状态、转染量、转染效率、裂解效率、加样精度、检测过程等），因此同批次样品检测值也可能出现浮动。所以实验一般需要做3个或3个以上复孔，并且引入另一个报告基因作为内参。 2．细胞培养时间不宜过长，12-36h内最好；长时间培养后，细胞难裂解 ...
[荧光素酶报告基因常见问题] 荧光素酶检测系统及荧光素酶报告基因载体什么是荧光素酶检测系统？如何使用荧光素酶报告基因载体？荧光素酶报告基因与其他分子相比有哪些优点？ Promega 公司的荧光素酶检测系统与其他常用的荧光素酶检测系统相比如何？ pGL3 荧光素酶报告基因载体与 pGL2 荧光素酶报告基因载体有何区别？报告基...
[双荧光素酶报告基因常见问题] 双荧光素酶测试系统及海肾类对照报告基因载体什么是双荧光素酶报告基因测试系统（ DLR ）？有哪些海肾荧光素酶载体？用双报告基因有何优点？相比用 CAT 或 β - 半乳糖苷酶对表达数据作归一化，双荧光素酶报告基因测试系统有何优点？海肾荧光素酶与萤火虫荧光素酶相比的相对活性如何？ ...
[GFP绿色荧光蛋白定量检测] GFP绿色荧光蛋白定量检测绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，GFP)是一类存在于腔肠动物体内的生物发光蛋白。1962年Shimomura等首先从多管水母(Aequoria victoria)中分离出一种分子量为20kD的称为Aequorin的蛋白。由于水母整体荧光及提取的蛋白质颗粒荧光都呈绿色...
[蛋白质精确定量] 应用NanoOrange荧光染料进行蛋白质精确定量 NanoOrange是一种新型的用于蛋白质精确定量的荧光染料，使用NanoOrange最低可以检测到100ng/ml的蛋白样品，其灵敏度高于Bradford 法 (1 µg/mL)和Lowry 法 (1 µg/mL)等分光光度方法，也高于280-nm吸光光度法(50 &mic...
[RNA精确定量] 应用RiboGreen荧光染料进行RNA精确定量 RiboGreen RNA定量试剂是一种超灵敏的核酸荧光染料，使用这种染料可以对溶液中的RNA进行简单快速的定量。常规定量RNA的方法是在260nm处检测溶液的光吸收度，但是这种定量方法灵敏度差（4μg/ml RNA），且易受溶液中寡核苷酸、蛋白、盐离子等的影响。使用RiboGreen荧光染料...
[GUS基因检测] 应用4mug进行GUS报告基因检测 Gus基因存在于E.coli等一些细菌基因组内，编码β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase，GUS)。β-葡萄糖苷酸酶是一个水解酶，能够水解β-葡萄糖醛酸苷的带有光学活性基因的衍生物，以4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷(4-methyklumbell...
[应用PicoGreen进行DNA精确定量] 应用PicoGreen荧光染料进行DNA精确定量对微量的双链 DNA 进行定量在各种生物学应用中都显得非常重要,例如 cDNA 文库的构建；用于亚克隆的 DNA 片段的纯化；定量 DNA 扩增产物,在药物中DNA 分子残留的测定等。检测核酸浓度最常用的方法就是检测核酸在 260nm ( A260 )处的光吸收，这一方法主要的缺点是单链核苷酸和单...
[P糖蛋白P-GP发光检测] P-糖蛋白（p-gp）发光检测 P-糖蛋白（P-gp），也被称为多耐药基因1（MDR1）和ABCB1，是一种170kDa的完整的质膜蛋白。P-糖蛋白是一个ATP依赖性转运蛋白，能将许多结构不同的化合物逆向转运出细胞。Pgp在人体正常组织肝脏、肾脏、肠道、胎盘、血脑屏障以及淋巴细胞系和心脏内小动脉、毛细血管等部位都有分布。P-gp在...

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